陈少鹏， 李秀芩， 邵伟华， 姚丽霞， 李芳， 李绍冰
(河北省人民医院 1.预防保健科，2.老年心血管病内二科，河北省石家庄市 050051)
慢性心力衰竭(chronic heart failure，CHF)多发于老年人，CHF会造成患者食欲下降，而长期营养摄入不足将会导致患者代谢紊乱[1]，且对于CHF患者，心力衰竭越严重，营养状态越差[2]。CHF患者睡眠障碍发生率高，睡眠障碍导致交感神经过度亢奋和体内炎症反应的发生，将加重心力衰竭进展[3]。研究表明，miR-423-5p、miR-499-5p、miR-210-3p可通过调节心肌重构相关基因的表达，参与心力衰竭的病理生理过程[4]。本文选取住院老年CHF患者便于对患者营养及睡眠进行监测和控制，避免不同饮食及不同环境对观察结果造成影响，并分析患者血浆miR-423-5p、miR-499-5p及miR-210-3p的水平与营养状况和睡眠质量间的相关性。
1.1 一般资料
选取2018年12月—2020年6月确诊为CHF的住院患者106例作为研究对象，其中男性62例，女性44例，冠心病61例，房颤34例，扩张型心脏病11例。纳入标准：①年龄≥80岁；
②CHF的诊断标准符合《慢性心力衰竭诊断治疗指南2018》[5]；
③患者及其家属对本研究知情并同意。排除标准：①合并急性大面积心肌梗死、严重脑出血及恶性肿瘤；
②入院前3个月接受大手术；
③合并消化道出血、自身免疫性疾病、感染性疾病等。本研究经本院伦理委员会批准。
1.2 营养状况和睡眠质量的评估
依据美国心脏病学会(NYHA)提出的心功能分级划分为Ⅱ级33例，Ⅲ级54例，Ⅳ级19例。采用微型营养评价量表[6](mini nutritional assessment，MNA)对老年CHF患者住院期间的营养状态进行评分，总分30分，≤17分为营养状况不良，18～23分为营养不良危险者，≥24分为营养状况良好。采用匹兹堡睡眠质量指数量表[7](pittsburgh sleep quality index，PSQI)对老年CHF患者住院期间的睡眠质量进行评分，总分21分，得分越高睡眠质量越差，≤4分为睡眠质量好，4～8分为睡眠质量一般，≥8分为睡眠质量差(即睡眠障碍)。
1.3 指标检测
采集患者入院后第2天清晨空腹肘静脉血4 mL，4 ℃，3 000×g离心10 min。取上清液，4 ℃、16 000×g离心10 min。取上清等量分装，保存至-80 ℃冰箱备用。qRT-PCR法检测血浆miR-423-5p、miR-499-5p、miR-210-3P水平，以U6作为内参，配制5 μL反应体系(5×Prime Script RT Master Mix 2 μL，RNase-free ddH2O 3 μL)，37 ℃、60 min，85 ℃、5 s。配置20 μL PCR反应体系：SYBR Premix Ex TaqⅡ(2×)10 μL，PCR正反向引物(10 μmol/L)各0.8 μL，ROX Reference Dye(50×)0.4 μL，cDNA 2 μL，灭菌蒸馏水6 μL。进行定量PCR反应，条件为95 ℃、5 s，60 ℃、20 s，40个循环。miR-423-5p、miR-499-5p、miR-210-3P的相对表达水平采用2-ΔΔCt方法表示。采用心脏超声诊断仪检测心功能指标左心室射血分数(left ventricular ejection fraction，LVEF)，左室内径(left ventricular diameter,LVD)和左房内径(left atrium diameter,LAD)。
1.4 统计学处理
2.1 不同心功能分级患者各指标比较
随着心功能分级的增加，患者LVEF及MNA评分逐渐降低，LAD、LVD、miR-423-5p、miR-499-5p、miR-210-3p及PSQI评分逐渐升高(P<0.05；
表1)。
表1 不同心功能分级的老年CHF患者各指标比较
2.2 miR-423-5p、miR-499-5p及miR-210-3p水平的相关性
患者miR-423-5p、miR-499-5p及miR-210-3p水平间均呈正相关(P<0.05；
表2)。
表2 miR-423-5p、miR-499-5p及miR-210-3p水平间的相关性
2.3 不同MNA和PSQI评分时miR-423-5p、miR-499-5p及miR-210-3p水平比较
随着MNA评分增加，miR-423-5p、miR-499-5p及miR-210-3p水平逐渐下降(P<0.05)；
随着PSQI评分增加，miR-423-5p、miR-499-5p水平逐渐上升(P<0.05；
表3)。
表3 不同MNA和PSQI评分miR-423-5p、miR-499-5p及miR-210-3p水平比较
2.4 miR-423-5p、miR-499-5p及miR-210-3p水平与营养状况的关系
CHF患者miR-423-5p、miR-499-5p及miR-210-3p水平与营养状况呈负相关(P<0.05；
图1)。
图1 老年CHF患者血浆miR-423-5p、miR-499-5p及miR-210-3p水平与营养状况的关系
2.5 miR-423-5p、miR-499-5p水平与睡眠质量的关系
CHF患者miR-423-5p及miR-499-5p水平与睡眠质量呈正相关(P<0.05；
图2)。
图2 老年CHF患者血浆miR-423-5p、miR-499-5p水平与睡眠质量的关系
miRNA参与调节细胞的增殖、分化、免疫及癌变。研究发现，多种miRNA在CHF中起重要作用[8-9]。miR-423-5p与心肌损伤及心室重构中相关基因的表达相关[10]。miR-499-5p可作为CHF患者潜在的预后诊断标志物[11]。而miR-210可抑制心肌细胞的凋亡、促进血管的生成，改善心脏功能[12]。晚期CHF患者miR-210-3p表达明显上调，且较其他miRNA差异最大[13]。
睡眠障碍在CHF患者中常见。患者睡眠质量差，将导致患者疲乏，无精力，机体代谢混乱，从而易造成患者高血压、心肌梗塞、中风及夜间心律失常，进而使CHF病情复杂化。除睡眠障碍外，营养不良也是CHF常见并发症，且老年CHF患者营养不良发生率更高[14]。CHF患者由于肠水肿及肠血流量减少，将影响进食及肠道营养吸收，而营养不良可诱发机体过度炎症反应，最终加重患者病情，影响患者预后[15]。
研究表明，足够的睡眠在控制血糖水平方面发挥重要作用，长期的睡眠障碍对碳水化合物代谢和内分泌功能具有不利影响，导致患者营养失衡[16]。本文结果显示，老年CHF患者随着心功能分级的增加，患者血浆miR-423-5p、miR-499-5p及miR-210-3p水平逐渐增加，且三者间的水平均呈正相关。老年CHF患者随着心功能分级的增加，MNA评分逐渐减少，PSQI评分逐渐增加，同时CHF患者miR-423-5p、miR-499-5p及miR-210-3p水平与营养状况具有相关性，miR-423-5p、miR-499-5p水平与睡眠质量具有一定相关性。
老年CHF患者心力衰竭程度与血浆miR-423-5p、miR-499-5p、miR-210-3p水平密切相关。同时，血浆miR-423-5p、miR-499-5p、miR-210-3p水平与营养状况和睡眠质量具有相关性。但本研究中纳入的病例数较少，需后期扩大样本和进一步临床证实。
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