孙生祯，赵全邦，游潇倩，阚 威，马艳萍，张茂华，张晓英，曾战壕
（青海省动物疫病预防控制中心，青海 西宁 810000）
兽医实验室作为动物疫病防控体系中的重要组成部分，对动物疫病的检测诊断具有重要的支撑作用[1]。实验室能力验证是为确保实验室维持较高的检测水平而对其能力进行考核、监督和确认的一种活动[2]。在兽医实验室能力验证中，实验室检测能力比对作为当前常用的验证方法和体现实验室综合能力的重要技术手段 , 直观地反映了兽医实验室的质量管理和生物安全水平。定期开展兽医实验室检测能力比对，评估各级兽医实验室检测能力，对兽医实验室的建设、运行及管理可起到促进和警示作用[3-5]。
组织全省动物疫病预防控制系统的实验室参加检测能力比对，是农业农村厅兽医局多年坚持的一项常规工作。2021 年9 月，青海省动物疫病预防控制中心按照中国动物疫病预防控制中心关于印发《2021 年省级兽医系统实验室检测能力比对实施方案》的通知（农牧便函【2021】76 号）要求，制定下发了《2021 年青海省州县级兽医实验室检测能力比对工作实施方案的通知》（青疫控【2021】44 号）[6-7]，组织全省47 个兽医实验室开展了检测能力比对工作，要求在规定时间内报送检测结果。比对试验结果总体上客观反映了青海省省兽医系统实验室的检测能力和技术水平。
1.1 材料
1.1.1 比对范围 全省8 个市（州）、39 个县（市）动物疫控中心兽医实验室全部参加了能力比对工作。
1.1.2 比对项目 根据农业农村部畜牧兽医局关于开展2021 年兽医系统实验室检测能力比对工作通知的相关要求，本中心制定了2021 年青海省州县级兽医实验室检测能力比对工作实施方案，本次比对市（州）级实验室共设置了3 个比对项目，分别为非洲猪瘟病毒核酸检测、高致病性禽流感H5/H7 亚型鉴别诊断和口蹄疫病毒O型抗体检测，其中非洲猪瘟病毒核酸检测和高致病性禽流感H5/H7 亚型鉴别诊断这两项实验各市（州）级根据当地疫病监测实际情况任选一项。县（市、区）级实验室共设置了4 个比对项目，分别为口蹄疫病毒O 型抗体检测、布鲁氏菌抗体检测、细菌染色镜检和非洲猪瘟病毒核酸检测。
1.1.3 比对样品 非洲猪瘟配套盲样血清样品由青岛立见生物有限公司制备与标定，高致病性禽流感配套盲样血清样品由哈尔滨国生生物科技股份有限公司制备与标定 , 口蹄疫配套盲样血清样品由中国农业科学院兰州兽医研究所制备与标定，布鲁菌配套盲样血清样品和细菌染色镜检所用样品由本中心制备，所有盲样经省中心验证后，由省动物疫病预防控制中心负责完成样品的分装和编号，并将样品在统一时间发放给参与比对的各个实验室，每个试验项目设置盲样5 份。
1.2 方法
1.2.1 比对方法 5 个检测能力比对项目所均采用相应的国家现行标 准、农业农村部公布或推荐的检测方法进行比对，具体见表1。
表1 比对试验的方法和参考标准
1.2.2 结果评判标准 结果判定标准详见表2。
表2 检测项目结果判定标准
2.1 总体结果
全省8 个市（州）、39 个县（市）动物疫控中心兽医实验室全部参加了能力比对，共检测盲样700 份，检测结果准确559 份，总准确率为79.86 %（559/700），其中准确率为100 % 的实验室有12 个，占参与比对实验室总数的25.53 %（12/47），详见表3。
表3 2021 年青海省兽医系统实验室能力比对结果
2.2 非洲猪瘟病毒核酸检测能力比对结果
共检测盲样70 份，结果准确69 份，准确率为98.57 %。14 个参与比对的实验室中5 份盲样检测结果均准确的有13 个，占参与比对实验室总数的92.86 %。
2.3 高致病性禽流感H5 亚型和H7 亚型鉴别诊断能力比对结果
8 个市（州）级兽医实验室只有黄南州选择了该比对项目，共检测盲样5 份，结果准确2份，准确率为40 %。
2.4 口蹄疫病毒O 型抗体检测能力比对结果
共检测盲样235 份，结果准确208 份，准确率为88.51 %。47 个参与比对的实验室中5 份盲样检测结果均准确的有32 个，占参与比对实验室总数的68.09 %。
2.5 布鲁氏菌抗体检测能力比对结果
共检测盲样195 份，结果准确127 份，准确率65.13 %。39 个参与比对的实验室中5 份盲样检测结果均准确的有15 个，占参与比对实验室总数的38.46 %。
2.6 细菌染色镜检能力比对结果
共检测盲样195 份，结果准确153 份，准确率78.46 %。39 个参与比对的实验室中5 份盲样检测结果均准确的有21 个，占参与比对实验室总数的53.85 %。
3.1 比对项目设置紧贴本省实际
在比对项目设置上充分考虑重大动物疫病、人兽共患病与地方性流行疫病相结合；
兼顾不同检测方法的原则，既设置了口蹄疫病毒抗体检测、布鲁氏菌抗体检测等传统检测项目，又按照当前疫情防控形势设置了非洲猪瘟病毒核酸检测和高致病性禽流感H5、H7 亚型鉴别诊断，同时根据各州级实验室现有硬件设施情况，相同项目具体检测方法也有所区别，对县级实验室设置了细菌染色镜检项目，以加强对基础检测方法的应用和能力提升。
3.2 市（州）级实验室检测准确率较高
比对结果显示，8 个市（州）级实验室总的检测准确率达到了62.5 %，除3 个实验室个别项目有偏差外，其余5 个实验室准确率均达到100 %，表明本省市（州）级实验室综合检测能力得到了持续提升。
3.3 县级实验室比对结果偏差较大
比对结果显示，县级实验室准确率较低，39个实验室准确率达到100 % 的只有7 个，尤其需要肉眼主观判定的项目出现偏差较多，布鲁氏菌病试管凝集实验和细菌染色镜检项目准确率仅为65.13 % 和78.46 %，表明本省县级实验室检测能力还普遍不高，这可能与人员技术水平提升慢、实际操作培训工作滞后、部分实验室硬件条件较差以及机构改革所致的实验室专业技术人员变动和岗位不足等因素有关。
3.4 重视程度和参与比对的积极性待进一步提高
个别实验室未按通知要求按时领取检测盲样，虽然按时上报了比对结果，但个别实验室在上报结果和检测报告时出现马虎和不规范现象，建议加强各级兽医主管部门和动物疫控机构对实验室检测能力比对工作的重视程度。
3.5 试剂的不统一对检测能力比对有一定的影响
2022 年开始，能力比对的试剂由各参加比对的兽医实验室自行准备，各地采购的试剂生产厂家不一、判定方法、灵敏度、符合率都有一定的区别，对样品检测后结果的判定带来一定的困难。
3.6 下一步工作建议
各地要结合近几年来兽医实验室检测能力比对情况，认真总结此次比对工作，深入分析，查找问题和不足，研究制定改进措施，狠抓落实，并建立健全实验室体系文件，规范实验室流程，进一步提升实验室管理和运行水平。同时采取多种方式，注重实验室质量管理、生物安全管理、常见检测技术和检测结果分析等方面的培训工作，保证人员技术和能力。各实验室应高度重视实验室检测人员岗位设置工作，充实检测队伍，同时还要确保实验室检测人员的相对固定，确保实验室工作的正常开展。
实验室仪器设备陈旧老化，超期服役、灵敏性较差等现象在各级兽医实验室，尤其是县级实验室普遍存在，这也直接影响检测的结果，只有把实验室环境和硬件条件提升到能满足各项试验条件的前提下，才能得出准确科学的检测结果。加强经费投入。从近几年考核、调研情况来看，各市（州）、县（市）普遍缺少实验室正常运转经费，实验室水电暖、耗材、试剂购置、仪器设备更新、实验室废弃物无害化处理及人员培训等运转经费都从省级转移支付的动物防疫经费中列支，加之近年来转移支付持续减少，各地兽医实验室经费缺乏，各地应加强向政府机构、主管部门工作汇报、交流沟通，努力使实验室正常运转经费从地方财政预算内得到列支，并长期坚持，使之成为实验室正常运转的有效保证。
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